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U266人骨髓瘤細胞培養說明書
更新時間:2020-04-30 點擊量:2093

細胞信息表

 

細胞名稱         U266人骨髓瘤細胞

種屬            人

組織來源          外周血

生長狀態          懸浮細胞

培養條件          培養基類型:RPMI1640培養基

                                                FBS:10%

              抗生素:雙抗

              培養條件:37℃,CO2:5%

 

傳代方法 :

收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態:

如果沒長滿,將培養瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮培養液,繼續培養。

如果細胞已經長滿(約80%-90%)則傳代后繼續培養。

 

貼壁細胞傳代方法:

  1棄去培養基,用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。

  2加1ml0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細胞接觸后放入37℃培養箱內,隨時觀察細胞狀態變化,待細胞大部分變圓后加*培養基終止消化。

 

懸浮細胞傳代方法:可以直接傳代也可以離心法傳代。

  1直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2-2/3,吹打細胞形成細胞懸液后,分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。

  2離心法傳代是將細胞連同培養液一并轉移到離心管內,1000rpm,5分鐘,去除上清,加新的培養液到離心管內,吹打細胞形成細胞懸液后,分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。

一般沒有特殊說明,細胞一般是一傳二。

 

凍存方法:

70%*培養基,20%FBS,10%DMSO,現用現配。

儲存:液氮中長期保存。

注  1觀察細胞建議在低倍鏡下觀察,便于整體估計細胞密度。

2在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發生部分脫落,可離心吹打后重新種入瓶中培養。

3收到細胞后若發現培養瓶破損、細胞污染等,請在一周內與我們聯系。

 

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